Kit de prueba rápida del antígeno del Ébola

La fiebre hemorrágica del Ébola es una enfermedad grave, a menudo mortal, en humanos y primates no humanos que ha aparecido esporádicamente desde su reconocimiento inicial en 1976. El virus del Ébola es uno de los tres géneros de la familia de virus de ARN llamados Filoviridae. Hay cuatro especies de virus del Ébola que afectan a los humanos: cepas del virus Bundibugyo (BDBV), del virus del Sudán (SUDV), del virus del bosque de Taï (TAFV) y del virus del Ébola (EBOV). La presencia de antígenos del virus del Ébola indica que el individuo puede estar actualmente infectado y ser capaz de transmitir el virus.

El kit de prueba rápida del antígeno del Ébola es un inmunoensayo cualitativo basado en membrana para la detección del antígeno del Ébola en muestras de sangre entera humana por punción venosa y punción digital.

El dispositivo de prueba consta de: 1) una almohadilla de conjugado de color burdeos que contiene anticuerpo anti-Ébola conjugado con oro coloide, 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene la línea de prueba (T) y una línea de control (C). La línea de prueba (T) está recubierta previamente con otro anticuerpo anti-Ébola y la línea de control (C) está recubierta previamente con IgG de cabra anti-ratón. Cuando se agrega un volumen adecuado de muestra al pocillo(s) de muestra del dispositivo, la muestra migra por acción capilar a través del dispositivo. Si la muestra contiene suficiente antígeno del Ébola, aparecerán líneas de color en la región de la línea de prueba (T). La ausencia de una línea de prueba sugiere un resultado negativo. Se incluye un control de calidad interno en la prueba, en forma de una línea de color que aparece en la región de la línea de control (C), lo que indica que la prueba es funcional y que se ha aplicado un volumen adecuado y suficiente de muestra para permitir la migración a través de las líneas de prueba y control, independientemente de si hay una línea de prueba o no. Si la línea de control (C) no aparece dentro del tiempo de prueba, el resultado de la prueba no es válido y la prueba debe repetirse con un nuevo dispositivo de prueba.

Uso previsto

Este kit está diseñado para usarse con muestras de sangre entera obtenidas por punción venosa y por punción digital como ayuda en el diagnóstico de EVE en pacientes con sospecha y con signos o síntomas consistentes con EVE que tienen factores de riesgo epidemiológicos para la exposición al virus del Ébola (p. ej., contacto con un caso conocido o sospechoso, viaje a una ubicación geográfica en un momento en el que se sabía o se sospechaba que había ocurrido la transmisión del virus del Ébola). Está destinado al uso profesional de diagnóstico in vitro. Los resultados obtenidos no deben ser el único determinante para la decisión clínica.

Materiales proporcionados

Cada kit contiene:

1.Dispositivos de prueba

2.Solución tampón de lavado

3.Goteros

4.Instrucciones de uso

Materiales necesarios pero no proporcionados

•Temporizador o cronómetro.

•Contenedores de recogida de muestras.

•Guantes desechables y/o ropa protectora.

•Micropipeta

•Lancetas (solo para sangre entera de la yema del dedo)

Advertencias

1.Lea completamente el prospecto antes de usar el producto. Las instrucciones deben seguirse cuidadosamente ya que no hacerlo puede dar lugar a resultados inexactos.

2. El kit es únicamente para uso de diagnóstico.

3. Realice la prueba a temperatura ambiente.

Precauciones

1. El kit es sólo para uso profesional.

2. Se deben seguir las instrucciones del prospecto para garantizar un rendimiento óptimo de la prueba.

3. El kit está diseñado para uso de diagnóstico in vitro.

4. Como ocurre con todos los ensayos de detección, cualquier resultado debe considerarse presuntivo hasta que se hayan realizado ensayos de confirmación de acuerdo con la práctica local o las pautas de la OMS.

*Precauciones de seguridad

1. Se deben observar las precauciones estándar para el manejo de agentes infecciosos al utilizar este kit.

2. Utilice ropa protectora, como bata de laboratorio, gafas de seguridad y guantes desechables, cuando manipule muestras y reactivos de ensayo.

3. Lávese bien las manos después de su uso.

4. En caso de contacto con los ojos, enjuagar inmediatamente con abundante agua y consultar a un médico.

*Precauciones de bioseguridad

Se deben utilizar prácticas de bioseguridad adecuadas al manipular muestras y reactivos. Estas precauciones incluyen, entre otras, las siguientes:

1. No fumar, comer, beber, aplicar cosméticos ni manipular lentes de contacto en las áreas en las que se manipulan muestras.

2. Deseche todas las muestras, dispositivos y tubos usados ​​como si fueran capaces de transmitir infecciones. Los métodos preferidos de eliminación son el autoclave a 121 ℃ durante un mínimo de 60 minutos o la incineración. Los materiales desechables pueden ser incinerados. Los desechos líquidos se pueden mezclar con desinfectantes químicos apropiados. Se recomienda una solución de lejía al 10%. Espere 60 minutos para una descontaminación eficaz. NOTA: No esterilice en autoclave soluciones que contengan lejía.

3. Cuando deseche el tampón de lavado, evite el contacto con ácido para evitar la liberación de gases tóxicos.

4. Todos los derrames deben limpiarse minuciosamente con un desinfectante adecuado, como una solución de hipoclorito de sodio.

5. Utilice un gotero y un dispositivo separados para cada muestra analizada.

*Precauciones de manejo

1. No lo utilice si el sello de seguridad de la caja del kit está ausente, dañado o roto.

2. No utilice ningún dispositivo si las bolsas han sido perforadas.

3. Cada dispositivo es para un solo uso.

4. No mezcle solución tampón de lavado/dispositivos de prueba de diferentes lotes de kits.

5. No utilice el kit después de la fecha de vencimiento (esta fecha está impresa en la caja del kit).

6. Se requiere iluminación adecuada para leer los resultados de la prueba.

7. El resultado debe leerse inmediatamente después de finalizar el tiempo de incubación de 10 minutos después de agregar la muestra y la solución tampón de lavado. No lea los resultados más allá de los 15 minutos.

Instrucciones de almacenamiento

1. El kit debe almacenarse entre 2 y 30 °C y su vida útil es de 24 meses.

2. Los componentes del kit son estables hasta la fecha de vencimiento impresa en la etiqueta exterior, si se almacenan según las instrucciones. La fecha de caducidad del kit está determinada por el componente que tenga la fecha de caducidad más corta. La fecha de caducidad del kit no se ve afectada una vez que se ha abierto la solución tampón de lavado. No utilice componentes del kit más allá de la fecha de caducidad total del kit.

3. Si se almacena refrigerado, asegúrese de que el dispositivo en bolsa alcance la temperatura ambiente antes de abrirlo.

4. No congelar el kit.

Recolección y preparación de muestras

Muestras aplicables: muestras de sangre entera por punción venosa y por punción digital.

1. Recolección de sangre completa por punción venosa: utilizando procedimientos estándar de flebotomía venosa, recolecte una muestra de sangre completa usando un tubo que contiene anticoagulante EDTA (parte superior de lavanda). Si las muestras no se analizan en el momento de la recolección, se pueden almacenar entre 2 °C y 30 °C (36 ℉ - 86 ℉) por hasta 24 horas.

2. Recoja sangre entera mediante punción digital: con una toallita antiséptica, limpie el dedo de la persona que se está examinando. Deje que el dedo se seque completamente o séquelo con una gasa esterilizada. Con una lanceta estéril, pinche la piel justo en el centro de la yema del dedo y perpendicular a las crestas de las huellas dactilares. Aplique una ligera presión junto al punto de punción. Evite apretar agresivamente el dedo para hacerlo sangrar. Limpie esta primera gota de sangre con una gasa esterilizada. Permita que se forme una nueva gota de sangre. La sangre total extraída mediante punción en el dedo debe analizarse inmediatamente.

3. No congele muestras de sangre entera.

Procedimiento de prueba

Deje que el dispositivo de prueba, la muestra y el tampón de lavado se equilibren a temperatura ambiente (15-30 °C) antes de realizar la prueba.

1. Retire el casete de prueba de la bolsa sellada y úselo dentro de una hora. Coloque el casete de prueba sobre una superficie limpia y nivelada.

2. Usando un gotero: sostenga el gotero verticalmente, extraiga la muestra hasta la línea de escala del gotero y transfiera la muestra al pocillo de muestra del casete de prueba (aproximadamente 10 ul), luego agregue tres gotas de tampón (aproximadamente 90 ul) al pocillo de tampón e inicie el cronómetro. Evite atrapar burbujas de aire en el pocillo de muestra.

Usando una micropipeta: Sostenga la micropipeta verticalmente, extraiga la muestra (10 ul) y transfiera la muestra al pocillo de muestra del casete de prueba, luego agregue tres gotas de tampón (aproximadamente 90 ul) al pocillo de tampón e inicie el cronómetro. Evite atrapar burbujas de aire en el pocillo de muestra.

3. Espere a que aparezcan las líneas de colores. El resultado de la prueba debe leerse a los 10 minutos. No interpretar el resultado después de 15 minutos.

Interpretación de resultados

Resultado negativo: si solo hay una línea de control de calidad C, la línea de detección es incolora, lo que indica que no se ha detectado el antígeno del Ébola y el resultado es negativo.

Resultado positivo: si aparecen tanto la línea de control de calidad C como la línea de detección, se ha detectado el antígeno del Ébola y el resultado es positivo.

Resultado no válido: si no se observa la línea de control de calidad C, no será válida independientemente de si existe una línea de detección y la prueba se realizará nuevamente.

Limitaciones

1. El kit es únicamente para uso de diagnóstico in vitro. La prueba debe utilizarse para la detección del antígeno del Ébola únicamente en muestras de sangre completa. Esta prueba cualitativa no puede determinar ni el valor cuantitativo ni la tasa de aumento de la concentración del antígeno del Ébola.

2. El kit solo indicará la presencia del antígeno del Ébola en la muestra y no debe utilizarse como único criterio para el diagnóstico de la infección por el Ébola.

3. Como ocurre con todas las pruebas de diagnóstico, todos los resultados deben interpretarse junto con otra información clínica disponible para el médico.

4. Si el resultado de la prueba es negativo y los síntomas clínicos persisten, se recomienda realizar pruebas adicionales utilizando otros métodos clínicos. Un resultado negativo no excluye en ningún momento la posibilidad de infección por Ébola.

Características de rendimiento

Sustancias que interfieren

Se han probado las siguientes sustancias potencialmente interferentes utilizando el kit y no se observó ninguna interferencia: